梅尼埃病(Ménières disease)是一種特發(fā)性內耳疾病,在1861年由法國醫(yī)師Prosper Ménière首次提出。該病主要的病理改變?yōu)槟っ月贩e水,臨床表現(xiàn)為反復發(fā)作的旋轉性眩暈、波動性聽力下降、耳鳴和耳悶脹感。本病多發(fā)生于30～50歲的中、青年人,兒童少見。男女發(fā)病無明顯差別。雙耳患病者約占10%～50%。目前已知的病因包括以下因素:各種感染因素(細菌、病毒等)、損傷(包括機械性損傷或聲損傷)、耳硬化癥、梅毒、遺傳因素、過敏、腫瘤、白血病及自身免疫病等。

豚鼠自身免疫免疫性梅尼埃病模型采用同種內耳抗原免疫豚鼠,部分動物能夠對同種內耳抗原產(chǎn)生免疫應答,導致了單側或雙側聽力受損,并出現(xiàn)眼震等梅尼埃病癥狀。 

模型制作方法:豚鼠,體重350g-400g,雌雄兼用。

抗原制備  同種內耳抗原(GPCAG)取自豚鼠新鮮期骨。處死豚鼠后立即在解剖顯微鏡下取出迷路組織,置放與4℃0.01mol/l PH7.2的PBS中搗碎,勻漿,2500r/min離心10min,取上清液在751紫外分光光度計測定蛋白的含量,將蛋白濃度調到1200ug/ml。制成后立即免疫動物或加1/10000NaN3低溫保存。

豚鼠免疫方法  以同種內抗原400ug/0.05ml+CFA0.5ML,于豚鼠后足及背部皮下注射,第14天重復注射1次;第28天GPCAG 400ug/0.5ml+CFA0.5ml,于豚鼠背部多點皮下注射,第42天重復第28天注射1次。免疫后第9周檢測動物模型是否成功。

觀測指標與分析:

 (1)、白細胞移動抑制試驗;

(2)、血清抗特異性內耳抗體;

(3)循環(huán)免疫復合物;

(4)、耳蝸電圖測試耳蝸微音電位和AP;

(5)內耳石蠟切片;

(6)、內耳酶免疫組化學。如實驗動物出現(xiàn)符合四個條件,即判斷為動物模型成功。